수컷 및 여성 호르몬의 모탄화수소 골격, 5α-androstane (5c), 또한 수용체 1에 의해 캡슐화되어 3b에 필적하는 친화력을 가진 (도 5E 및 무화과) . S35 및 S47). 호스트 게스트 복합체 1″•5c의 결정은 NO3− 대역전과 유사한 Pd(II) 연결된 수용체 1″을 사용하여 수득되었다. 결정 구조 분석은 게스트 탄화수소와 수용체 1의 다방향족 패널 사이에 다중 근접 접촉(≤3.2 Å)의 존재를 다시 확인하였다”(무화과). S18, B에서 D). 다운로드 : 고해상도 이미지 다운로드 (177KB)다운로드 : 다운로드 풀 사이즈 이미지 모노 클로날 항체 (mAbs)는 광범위한 항원을 인식 할 수있는 높은 특이성과 능력으로 인해 많은 분야에서 널리 사용됩니다. IL-17A는 다른 전염증성 사이토카인과 함께 단독으로 그리고 상승적으로 모두 빠른 염증 반응을 유도할 수 있다. 축적 된 증거는 IL-17A 신호의 치료 개입이 자가 면역 질환과 암에 대한 매력적인 치료 옵션을 제공한다는 것을 시사한다. 여기서, 우리는 새로운 항hIL-17A 항체의 친화성 및 열안정성을 최적화하기 위한 조합접근법을 제시한다.
큰 순진한 파지 표시 라이브러리에서, 우리는 재조합 인간 IL-17A의 효과를 중화 할 수있는 안티 IL-17A mAb 7H9를 격리. 그러나, 겸손한 중화 효능과 가난한 열안정성은 치료 응용 을 제한합니다. 체외 친화도 최적화는 효모 표시 무작위 돌연변이 생성 라이브러리를 사용하여 8D3를 생성하는 데 사용되었다. 이것은 4개의 중요한 아미노산 변경 귀착되고 세포 기지를 둔 중화 분석결과에 있는 대략 15 배 힘 증가를 제공했습니다. 8D3의 상보성 결정 영역(CR)을 huFv 4D5의 안정프레임워크상에 추가로 접착하여 열안정성을 향상시켰다. 생성된 하이브리드 항체 9NT/S는 원래 항체를 넘어서는 우수한 안정화 및 친화성을 가지고 있다. 인간 섬유육종 세포 기반 분석 및 마우스에서의 생체 내 분석은 항-IL-17A 항체 9NT/S가 IL-17A-유도 전염증성 사이토카인의 분비를 효율적으로 억제한다는 것을 나타냈다. 따라서, 이러한 리드 항-IL-17A mAb는 IL-17A 관련 질환을 치료하기 위한 잠재적인 동급 최강의 후보로 사용될 수 있다. 여기서, 우리는 캡슐 형 분자 수용체 1 (도 1C)이 높은 친화성 (Ka = ~ 107 M−1)을 가진 공동에서 안드로겐 호르몬의 단일 분자를 물에 결합한다고보고합니다. 경쟁 실험은 합성 수용체가 생물학적 안드로겐 수용체와 유사한 방식으로 다양한 천연 성 호르몬을 우선적으로 결합한다는 것을 밝힙니다: 안드로겐 [예를 들어, 테스토스테론(2a) 및 안드로스터론] >> 프로게스토겐 및 에스트로겐 [예를 들어, 프로게스테론(3a), β-estradiol (4a), 및 에스티올(fig1.1). S1)을 참조하십시오.
결과 호스트 게스트 복합체의 x선 결정학적 분석은 관찰된 선택성이 기판과 1의 다방향족 프레임워크 사이의 다중 CH/OH-π 및 수소 결합 상호작용에서 발생한다는 것을 시사한다. 우리는 또한 지표 변위 분석기를 사용하여 나노그램 규모에 물에 결합하는 테스토스테론의 형광 검출을 보고합니다. 수용체 1의 결합 친화도는 남성 호르몬 2a, 디하이드로에피안드로스테론(2b), 디하이드로테스토스테론(2c), 안드로스테론(2d), 및 안드로스테론(2e)을 향한 유사한 조건하에서 경쟁적인 캡슐화 실험을 통해 확립되었다(도 4A). 예를 들어, 2a 및 2c(각각 1.0 equiv)를 1로 처리하면 호스트 게스트 복합체가 51:49 비율로 1/2a 및 1/2c를 발생시켰습니다(그림).